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浅谈层析实验中的气泡问题(三)

日期:2024-11-21 17:15
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摘要:浅谈层析实验中的气泡问题(三)
那么下面上海嘉鹏科技有限公司为大家简单介绍一下浅谈层析实验中的气泡问题(三):

       说到气泡,你可能会联想到酣畅淋漓的可乐,通透上头的啤酒,亦或是流光飞舞的浪漫,生活中的气泡,似乎还带有那么一丝美好,然而对于实验来说,尤其是在大多不会配置在线脱气单元的FPLC系统上做的层析实验,气泡就如烦人的苍蝇,鞋里的石子,令人如鲠在喉不吐不快,如若是重要样品、昂贵填料,气泡带来的实验失败那简直是小型灾难现场。那么气泡是源自何来,而又去之何处,怎么能让它们从我们的系统里消失,以下此篇,做一个小小探讨,抛砖引玉,共谋对策而灭之。


关于气泡来源,正如病从口入,无非就是进入系统的开口处:流动相,或者流路中相对负压处的漏点;如果流动相脱气不理想或仪器本身连接管路、组件存在问题,流路中将形成肆意妄为的气泡,引发一系列问题: 

      1. 组分峰面积变化,峰形变化;
      2. 形成尖峰或锯齿状噪声;
      3. 出现鬼峰 ,基线漂移波动增大;
      4. 泵动作失常,压力波动,检测基线全抖;
      5. 填料走空,干柱;
      6. 溶解氧可能氧化样品组分和(或)流动相及固定相组分,使检测失真。
实际案例



Fig.1 气泡造成的UV杂峰

Fig.2 气泡造成的系统压力波动


这些症状基本能覆盖大部分的层析实验问题,可见气泡的破坏力和恼人程度,知己知彼方才能有的放矢,那么气泡是如何形成的呢?流动相中气体形成的原因有多种,*根本的还是由于气体在液体中达到过饱和状态;平衡状态时溶解空气的量与溶液的性质、气体的种类有关,也与外界条件有关, 主要的外界条件有以下 3 种。


气体的溶解量与气体的种类有关,也与溶剂的种类有关。通常极性低的气体容易溶解于低极性的溶剂,极性高的气体容易溶解于高极性的溶剂。通常当两种不同的溶剂混合时,混合溶剂中溶解的空气量也将发生变化。大量实验证明:混合溶剂中溶解的空气量比各个纯溶剂的空气溶解量要小。
● 配置缓冲液时,大多会进行不同液体的混合,液体热力学体积的变化,和放热吸热,都会产生气泡,如配置20%乙醇溶液,酸溶液,盐溶液,乙腈溶液,会明显有气泡产生,此时就需要对溶液进行静置或脱气操作