凝胶成像，经典知识剖析（二）

日期：2024-11-23 09:46

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摘要：凝胶成像，经典知识剖析（二）

那么下面上海嘉鹏科技有限公司为大家简单介绍一下凝胶成像，经典知识剖析（二）：

一. 多种光源可选
一般的凝胶成像系统，提供 302nmUV、254nmUV、365nmUV、蓝光及白光光源。
① **防护隔离
触摸控制电源开关、光源控制、光圈、聚焦等观察和拍摄工作，实现污染现场和电脑操作现场隔离，防止交叉污染，确保操作者**，抽屉式样品载物台，方便取放样品。
② 直接切胶

凝胶成像系统也可直接切胶，操作应遵循说明书的指示，尤其注意对激发光源（无论是紫外，光或者蓝光）进行相应的防护。

二. 应用范围
从整体总的来说凝胶成像（系统）可应用于：蛋白质、核酸、多肽、氨基酸、多聚氨基酸等其他生物分子的分离纯化结果作定性分析
① 分子量定量
对于一般常用的DNA胶片,利用分子量定量功能,通过对胶上DNA Marker条带的已知分子量注释,自动生成拟合曲线,并以它衡量得到未知条带的分子量。通过这种方法所得到的结果较肉眼观察估计要准确很多。
② 密度定量
一般常用的测定DNA(脱氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸)浓度的方法是紫外吸收法,但它只能测定样品中的总核苷酸浓度,而不能区分各个长度片段的浓度。利用凝胶成像系统和软件,先将DNA胶片上某一已知其DNA含量的标准条带进行密度标定以后,可以方便的单击其他未知条带，根据与已知条带的密度做比较，可以得到未知DNA的含量。此方法也适用于对PA GE蛋白胶条带的浓度测定。
③ 密度扫描
在分子生物学和生物工程研究中，我们*常用到的是对蛋白表达产物占整个菌体蛋白的百分含量的计算。传统的方法就是利用专用的密度扫描,但利用生物分析软件结合现在实验室常规配备的扫描仪或者直接用白光照射的凝胶成像就能完成此项工作。
④ PCR定量
PCR定量主要是指，如果PCR实验扩增出来的条带不是一条，那么可以利用软件计算出各个条带占总体条带的相对百分数。就此功能而言，与密度扫描类似，但实际在原理上并不相同。PCR定量是对选定的几条带进行相对密度定量并计算其占总和的百分数，密度扫描时并对选择区域生成纵向扫描曲线图并积分。

图像处理界面

凝胶成像结果

三. 注意事项
1、开关抽屉时防止将EB沾在抽屉或暗箱上，如不慎沾上EB，擦干后用水冲洗；
2、透射板紫外灯寿命有限，调整图象后及时成像；
3.、若长时间不进行操作，机箱总电源将在10分钟后关闭；
4、拍摄时，请注意不要将过量的缓冲液倾倒在投射底座上；
5、凝胶应及时清理，防止凝胶固化后贴附在透射板上，造成成像不清晰；
6、实验完毕以后请不要将暗箱式抽屉完全关闭，以保证暗箱内空气畅通；
7、请勿用该电脑处理文档等，如需拷贝图片，请将移动盘格式化后再插入；
8、请注意保管好软件加密狗和软件光盘，以免遗失。

以上就是上海嘉鹏科技有限公司为大家整理总结关于凝胶成像，经典知识剖析（二）。
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