超声破碎细胞常见问题

如果是基质菌丝的话,好可以考虑用溶菌酶处理下。
般来讲这几种方法读可以的:
,液氮研磨
,用french press破碎
三，超声波破碎
四，溶菌酶处理预处理
为什么用塑料大试管,玻璃的不可以吗？
答：不可以的。那么先让我来解释下超声波细胞粉碎仪超声破碎的原理吧。
    超声波是物质介质中的种弹性机械波，它既是种波动形式,又是种能量形式。超声对细胞的作用主要有热效应，空化效应和机械效应。热效应是当超声在介质中传播时，摩擦力阻碍了由超声引起的分子震动，使部分能量转化为局部热。空化效应是在超声照射下，生物体内形成空泡，随着空泡震动和其猛烈的聚爆而产生出机械剪切压力和动荡。另外，空化泡破裂时产生瞬时温压，可使水蒸气热解离产生.OH自由基和.H原子，由.OH自由基和.H原子引起的氧化还原反应可导致多聚物降解、酶失活、脂质过氧化和细胞杀伤。机械效应是超声的原发效应，超声波在传播过程中介质质点交替地压缩与伸张构成了压力变化，引起细胞结构损伤。损伤作用的强弱与超声的频率和强度密切相关。所以如果使用玻璃管，可能会碎裂，而通常使用的是塑料试管。
    100g大肠杆菌溶于1L破碎液里，搅拌发现菌液发粘，菌体不能够很好分散，用超声波细胞粉碎仪破碎，加压后，菌液不能进入匀质机，速度很慢，请问是何原因？能有好的办法解决，很好用匀质机快速破碎菌体？
   答：将破碎液的量加大，不能很好分散可能是量太大 ，超声处理5－10分钟，菌液粘度即可大大降低，也可促进菌体分散。不同型号的超声波细胞破碎仪功率不样，功率的大小决定了使用变幅杆的大小范围，你使用多大的变幅杆就在设备的上调至该刻度！变幅杆的大小决定了处理量5ml下选3mm，5～50ml可选6～8mm，50ml以上选10mm的变幅杆，依此类推！
酵母破碎的问题
   答：般的PROTOCOL都是用超声波细胞破碎仪破碎酵母细胞sigma G-8772 酵母破碎效果好的我所做过的方法中还是玻璃珠，效率很，而且对目的蛋白活性不会有什么影响。般应该用这个方法。 化学裂解的方法，10g酵母 加1ml的乙酸乙酯，充分搅拌至液体状。此法的裂解效果不错的加尿素裂解液，在破碎遇到的问题是菌体浓度太低，OD620nm在4-6之间。细胞破碎仪的低破碎体积为4ml左右，这样我再稀释倍，我怀疑破碎完溶出蛋白和酶活测定时会测不准。破碎后，你可将液体放入透析袋中浓缩

上海金鹏分析仪器有限公司
电话：021-60959971   61425398   36162366
手机： 18918199710 13585698333 13764356938
QQ:964122960，765695826， 842727501， 2460311703， 2431022418，170324176
传真：021-36162369
地址：上海市真陈路1398弄15号 邮编：200444